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青霉素适用于敏感细菌所致各种感染,如脓肿、茵血症、肺炎和心内膜炎等。其中青霉素为以下感染的首选药物: 
1.溶血性链球菌感染,如咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、蜂窝织炎和产褥热等。 
2.肺炎链球菌感染如肺炎、中耳炎、脑膜炎和菌血症等。 
3.不产青霉素酶葡萄球菌感染。 
4.炭疽。 
5.破伤风、气性坏疽等梭状芽孢杆菌感染。 
6.梅毒(包括先天性梅毒)。 
7.钩端螺旋体病。 
8.回归热。 
9.白喉。 
10.青霉素与氨基糖苷类药物联合用于治疗草绿色链球菌心内膜炎。 
青霉素亦可用于治疗:
1.流行性脑脊髓膜炎。 
2.放线菌病。 
3.淋病。 
4.奋森咽峡炎。 
5.莱姆病。 
6.鼠咬热。 
7.李斯特菌感染。
8.除脆弱拟杆菌以外的许多厌氧菌感染。 风湿性心脏病或先天性心脏病患者进行口腔、牙科、胃肠道或泌尿生殖道手术和操作前,可用青霉素预防感染性心内膜炎发生。
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