(1)应用自动分析仪时可根据仪器条件及试剂反应情况设计反应程序。自动分析仪要求酶反应快速(最好5min内完成反应)。反应慢的试剂只可用于手工操作待反应达到终点时再比色。试剂和标本用量可根据比色杯容积按比例放大或缩小。
(2)为保证酶反应迅速、完全并利于酶试剂长期稳定保存要求酶制剂性能好、酶过量。酶试剂配好后一般应可在4℃存放3天以上。不同批试剂应检查反应到达终点时间、颜色稳定性及线性范围。
(3)如样品中胆固醇含量超出试剂线性范围(一般酶试剂测定范围应为5g/L以内)可用生理盐水稀释标本再测结果须乘以稀释倍数。
(4)血清中胆红素0.1g/L以下、抗坏血酸0.05g/L以下及轻度溶血不至于影响结果。血清中其他类固醇含量甚微不引起明显干扰。
(5)在仪器稳定及操作者熟练的情况下批内CV<1%批间CV<2%。
(6)由于纯胆固醇与血清胆固醇基质不同反应速度不同在酶法测定时如用纯胆固醇标准结果往往偏低。因此主张用标准参考血清做标准以达到与血清标本相同的反应标准参考血清应用参考方法以附合国际标准的纯胆固醇为标准标定。该标准血清可存放于-20℃保存1年。不宜反复冻融。