霍乱弧菌检测

的介绍
霍乱弧菌检查常规方法是直接涂片、染色检查、动力观察制动试验。阳性结果的临床分析显微镜检查可作为快速诊断的参考。革兰染色镜检可见典型革兰阴性弧菌。悬滴暗视野检查可见穿梭样活泼运动。免疫制动试验阳性,具有重要参考意义。上述结果只能做出初步诊断,最后的确诊仍需以培养结果为准。

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注意事项
检查时: 
1、采集时请避免挖取沾到马桶內尿液及自来水的部分;同时也请勿将粪便直接置于卫生纸或擦手纸上。 
2、为避免干扰检验结果请勿使用棉花棒挖取。 
3、粪便采集量请勿过少以避免无足够的检体以供检验。 
4、若需要以化学法检测粪便潜血时请于采集前三天避免进食红肉、肝脏及菠菜、甘蓝、花椰菜等食物以避免造成伪阳性结果。 
5、若是以免疫法检测粪便潜血时您不需要限制饮食种类。 
6、因为婴幼儿不容易一次取到足量的检体若需要分次收集时请将检体暂时置于冰箱冷藏保存以避免细菌滋生。 
不适宜人群
不适宜人群:没有霍乱症状的人。
不良反应与风险
一般无并发症和危害。
临床意义
异常结果: 
阳性结果的临床分析:显微镜检查可作为快速诊断的参考。革兰染色镜检可见典型革兰阴性弧菌。悬滴暗视野检查可见穿梭样活泼运动。免疫制动试验阳性,具有重要参考意义。上述结果只能做出初步诊断,最后的确诊仍需以培养结果为准。 
阳性:见于霍乱。 
检查过程
1、增菌 称取检样25g加入装有225mL碱性蛋白胨水(APW)的广口瓶内。固体样品应以均质器9000r/min~10000r/min打碎或以剪刀充分剪碎。(36±1)℃培养6h~8h和16h~24h。 如为牡蛎样品应同样制备另一份检样置于APW中42℃培养6h~8h和16h~24h。 
2、分离 以3mm~5mm接种环取6h~8h和16h~24h增菌培养液的表面生长物一环分别划线家终于TCBS琼脂平板至少各一个于(36±1)℃培养18~24h。 在TCBS琼脂上典型的霍乱弧菌菌落为大的光滑黄色稍平具有不透明中心和半透明的边缘。 
3、初步鉴定 
(1) 用接种环挑取TCBS琼脂平板上2~5个可疑菌落划线于T1N1琼脂平板上(36±1)℃培养12h~18h。 
(2) 以无菌白色滤纸沾取T1N1琼脂表面培养物滴加氧化酶试剂进行氧化酶试验。
(3) 以无菌环取氧化酶阳性的培养物于0.5%去氧胆酸钠液试剂滴中进行粘丝试验。 
(4) 以接种针取氧化酶和粘丝试验阳性的培养物接种TSI、KIA和AGS穿刺底层并划线斜面。 
(5) 以接种针取上项相同培养物接种T1N0和T1N3肉汤。 
(6) 将TSI、KIA、AGS、T1N0和T1N3肉汤于(36±1)℃培养18h~24h。
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