结核病免疫学γ-干扰素释放试验（IGRA）检测技术

        结核病是严重威胁人类健康的传染病之一。世界卫生组织《全球结核病报告（2014年）》指出，2013年全球新出现结核病约900万例，死亡150万例，其中36万例合并HIV感染，而中国新增病例占全球的11%，接近100万例。结核分枝杆菌（MTB）属胞内寄生菌，感染人体后首先引发机体固有免疫反应,但多数情况下固有免疫不足以抑制或清除MTB的生长繁殖，随后吞噬了MTB的巨噬细胞释放MTB相关抗原，由抗原递呈细胞摄取、加工递呈给特异性的CD4+、CD8+及γδT细胞，产生致敏的T细胞并辅助B细胞活化产生特异的结核抗体，从而引发获得性免疫应答反应。
        目前常用的MTB检查方法主要包括病原学诊断、免疫学诊断、分子生物学诊断以及病理学诊断等。其中以免疫学诊断技术最为常用，可分两类：
       1.体内试验：结核菌素皮肤试验（TST），又称为PPD试验。皮下注射MTB抗原后48-72h内，局部出现红肿硬节，呈现变态反应阳性。该方法不能有效区分是结核分枝杆菌的自然感染还是卡介苗接种引起的免疫反应。另外，近期感染MTB（２周之内）、小儿结核、老年人结核、免疫缺陷或免疫功能低下等患者，常出现假阴性结果。目前，该法已逐步淘汰。
        2.体外试验：包括MTB抗原、抗体及γ-干扰素释放试验（IGRA）检测。前两者因影响因素较多，在一定程度上限制了临床应用。
        IGRA是近年来结核病免疫学诊断的重要技术，其原理：当机体感染MTB后，会产生抗原特异性的致敏Ｔ淋巴细胞并长期存在于血循环中，当此类致敏的T细胞再次接触MTB特异性抗原时，能迅速活化增殖，释放γ干扰素。根据这一机制，抽取患者外周全血或制备单个核细胞悬液，加入特异性的MTB抗原进行培养，即建立体外增殖系统，通过检测培养上清中的γ－干扰素水平的变化来判断有无MTB的感染。根据检测γ-干扰素的不同可分为酶联免疫技术（ELISA）和酶联免疫斑点技术(ELISPOT)。
        IGRA诊断结核的优点：
（1）所用刺激抗原ESAT-6、CFP-10或TB7.7在卡介苗（BCG）中缺失，因此避免了前期BCG接种引起的交叉反应。特异性、敏感性均优于TST。
（2）所用刺激抗原只存在于结核分枝杆菌群(包括人型分枝杆菌、牛型分枝杆菌和非洲型分枝杆菌)及其它少数几种致病性分枝杆菌，如堪萨斯分枝杆菌、Szulgai分枝杆菌及海分枝杆菌中，因此与其他大多数环境分枝杆菌的交叉反应较少。