九院稀少精子冷冻技术

卵子珍贵，有时候精子更加珍贵！保存极其稀少的精子甚至比保存卵子还要困难！！

如何获得并高效保存极其稀少的精子曾经是业界的难题。"九院原创"之一的稀少精子冷冻技术提高了稀少精子的使用效率，最大限度的避免了反复睾丸取精，并使得新的取精技术能够在临床开展。很多家庭因这个技术获得自己的血亲后代。

稀少精子冷冻－九院创造

作者

薛松果 胚胎专家

上海第九人民医院辅助生殖科

临床应用价值高

男方因素约占不孕症病因的30-40％，无精症约占男方因素的10％。1992年Palermo等将卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection，ICSI)技术应用于辅助生殖临床，解决了男方因素不孕症治疗时常规体外授精的受精难问题，使严重少、弱精子症患者生育遗传学后代成为可能。

而ICSI技术联合显微外科取精术又实现了无精症患者生儿育女的愿望。

小知识

显微外科取精术一般包括附睾精子抽吸术(microsurgical epididymal sperm aspiration，MESA)、经皮附睾穿刺取精术(percutaneous epididymal sperm aspiration，PESA)和睾丸精子抽取术(testicular sperm extraction，TESE) 等。

然而

MESA、PESA和TESE等都是创伤性手术，多次反复手术可能造成睾丸、附睾组织纤维化，导致不可逆的睾丸萎缩、生精功能退化。

为了尽可能地减少患者反复穿刺取精的痛苦，更好地保全男性的生精功能，医学工作者尝试将无精症患者诊断性穿刺获得的微量活动精子冷冻保存，在女方采卵日将冻存的精子复苏后行ICSI，这将大大提高该类患者辅助生育治疗的灵活性和可靠性。

技术难度大

但是

传统的精子冷冻采用1.8mL的冷冻管(Cryovial)或0.25－0.5mL麦管(Straw)作为冷冻载体，冷冻/复苏过程需要对精子作2-3次离心洗涤，每一步操作都会造成精子不同程度的损失。而睾丸或附睾穿刺获得的精子一般数量少、活力差，常规冻存复苏后，往往难以找到足够的活动精子行ICSI，所以传统方法不适用于对穿刺获得的稀少精子进行冷冻保存。

现状

自Jacques Cohen等报道用空透明带作为载体进行人单个精子冷冻以来，有多个载体被报道可用于单个或稀少精子的冷冻保存，如冷冻环（Cryoloop）、Cryotop、Cell Sleeper等等。但截至目前，尚没有一个理想的、简单、高效的方法和载体用于人辅助生殖临床中对无精症患者穿刺获得的精子进行冻存。

上海九院辅助生殖科早在2008年就开始研究稀少精子的冷冻保存问题。我们的经验是，一个好的、适合在临床上推广使用的（不仅仅是研究用）稀少和单个精子冷冻的技术，应该满足三个条件：

1

回收率高

这是前提，没有高回收率则会导致复苏后精子数量不足而取消ICSI治疗周期，或被迫做卵子冷冻（该技术目前并不成熟，冷冻卵子的总效率仅为新鲜卵子的50-60%）。

2

复苏存活率高

这是关键，要尽可能提高稀少和单个精子复苏后的存活率。

3

易于使用、可及性强

临床技术人员是否愿意使用对一个技术方法的推广至关重要。

九院方法

我们用自制的冷冻片Strawtop冷冻睾丸/附睾穿刺获得的稀少精子。利用该方法冷冻精子，精子损失率低、回收率高，复苏后无需离心洗涤就可直接用于ICSI。与传统的0.25mL麦管法相比，二者在复苏精子受精率、优质胚胎率、临床妊娠结局等方面均无差异，但Strawtop稀少精子冷冻方案可大大降低无精症患者反复穿刺的发生率，极大的避免了取卵日无精子可用而被迫取消周期的情况发生。该方法在本科室已经成功应用了6年。我们还获得了两项稀少精子冷冻方法和载体的国家专利。

冷冻

解冻

九院已有成绩

Strawtop稀少精子冷冻

2009年3月18日-2015年12月31日

558人次，2960支，5.3支/人/次

附睾穿刺93人次，睾丸穿刺316人次，睾丸切开47人次，精液102人次。