从获取精原干细胞到ROSI技术：从无精到有精还有多远？

姚晨 成思邈健康

无精到有精到底还有多远？手术做完没有找到精子就真的没有希望了吗？精子冻不了，就没有办法进行生育力保存了吗？这些都是困扰广大患者的问题，也是临床男科医生所有面对的难题。上海市第一人民医院男科李铮

当前，全球范围内育龄人群生育力呈现整体下降趋势，WHO人类生殖特别规划署报告全球人群不孕不育率至少15%，全球不孕夫妇约6000-8000万对，不孕不育与肿瘤、心血管疾病并列成为当今影响人类健康的三大疾病。据人口协会公布的《中国不孕不育现状调研报告》,我国不孕不育率已高达15%-20%，不孕夫妇约为2000万对。其病因约50%源自男方因素，男性生育力下降包括精子数量和质量的下降，而针对不同的患者应采取以下不同的男性生育力保存方式。

1.有精子人群的生育力保存主要方式：精子冷冻

临床门诊上遇到的患者的精液分析报告中大多是少弱精子症，这些患者的精子如何保存是男性临床实验室遇到的难题之一，因为数量极少，常规的冷冻方法不适用于数量极少的精子；为了解决这个问题，提高精子复苏后的存活率以及复苏率，上海市第一人民医院李铮团队开创式地运用了稀少（单）精子冷冻技术。该种技术可以很好地保存极少量的精子。部分无精子症患者经过新辅助内分泌治疗后可以在精液中找到极少量精子，这些极少量精子承载着患者的希望，因此对于这些精子的处理就显得尤其重要，临床实验室会对这些精子进行稀少（单）精子冻融，保存住患者的希望。

在使用新辅助内分泌治疗一段时间无效的患者，还可以进行手术治疗，针对梗阻性症患者，输精管-输精管吻合或者输精管-附睾吻合可以使患者有自然怀孕的可能，但是以防万一，我们推荐还是要进行精子冷冻；对于非梗阻性无精子症，通过显微镜下取精手术，针对不同病理类型，找到精子的概率不尽相同，对于取到的这些极少量的睾丸精子，临床男科实验室根据精子数量以及质量，选择进行稀少精子冷冻或者单精子冷冻。

上海市第一人民医院李铮团队在此基础上，得到了2017年国家重点研发计划的资助，进行男性生育力保存的研究，着重在于稀少（单）精子冻融的改进和优化，分别从冷冻保护剂、载体和冷冻条件上改进技术，为患者提供更加安全有效的配子冻融方案。

2.ROSI技术助孕

临床上部分患者睾丸组织中没有成熟精子，但是有少量未成熟的精子细胞（精子发育示意图），这些未成熟的精子细胞通过ROSI（具体名称）技术也可以使女方受孕，日本神户大学的科学家利用此技术已经出生了14个子代。

李铮团队临床男科实验室会仔细检测每一个患者睾丸组织中的各类细胞，利用显微操作，冻融患者精子细胞，使得患者有生育自身子代的可能。

3.从精原干细胞保存到ROSI助孕

对于未能取到精子的非梗阻性患者，因为在这些患者睾丸中没有成熟的精子或者单倍体精子，因此无法进行稀少（单）精子冻融技术。但是，目前干细胞技术可能是解决这一难题的解决方案之一，虽然非梗阻性无精子症患者睾丸组织中没有成熟的精子，但是可能存在精原干细胞，这些干细胞是生成精子的种子细胞。

上海市一李铮团队在前期的研究成功地将隐睾患者的精原干细胞体外诱导分化为精子细胞，并具有受精能力。对于没有找到精子的这类患者，可以进行对其进行睾丸组织消化，获得其精原干细胞，并对其进行冻融，进而在体外对精原干细胞进行诱导分化为圆形精子，最终通过ROSI技术使患者生育自身子代。

因此，从精原干细胞保存到ROSI助孕，将会为部分无精症患者实现无精到有精提供新的希望，为渴望能够生育自身子代的患者提供无限的可能。

参考文献

1.Yang S,et al.Generation of haploid spermatids with fertilization and development capacity from human spermatogonial stem cells of cryptorchid patients.Stem cell reports 3,663-675(2014).

2.Tournaye H,Dohle GR,Barratt CL.Fertility preservation in men with cancer.Lancet(London,England)384,1295-1301(2014).

3.Liu F,et al.A novel micro-straw for cryopreservation of small number of human spermatozoon.Asian journal of andrology 19,326-329(2017).

4.Tanaka A,et al.Fourteen babies born after round spermatid injection into human oocytes.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 112,14629-14634(2015).

作者简介：姚晨成，上海市第一人民医院泌尿男科在读博士，主要从事男性不育发病机制、男性不育患者的生育力保存等方面的基础与临床研究。上海交通大学附属第一人民医院泌尿中心男科团队门诊时间一览表

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