幽门螺杆菌检测中需要注意的几个问题

一、H.pylori感染的检测方法

(一)常用的侵入性和非侵入性检测方法

根据检测方法取材是否需要通过内镜检查，可以将H.pylori的检测方法分为侵入性和非侵入性方法，前者主要包括胃黏膜标本直接涂片染色检菌、组织学染色、快速尿素酶试验(RUT)、细菌培养、基于H.pylori特定基因检测(包括PCR检测、realtimePCR检测和基因芯片检测)等;后者主要包括尿素呼气试验(UBT)、粪便抗原检测(SAT)、血清学检测等。随着内镜技术的不断发展，放大窄波长内镜、共聚焦显微内镜在临床的应用，使得在体观察H.pylori感染的内镜下征象(汇集小静脉不规则排列和结节状胃炎等)成为可能，但该方法需要相关的检测设备并由经过训练的医师应用，因此在临床目前还不能够普及。

(二）不同检测方法的原理

根据检测方法的原理，可分为微生物学方法、形态学方法、尿素酶依赖方法、血清学方法和分子检测方法等。微生物学方法主要为细菌分离培养，该方法是诊断H.pylori感染的“金标准”;形态学方法主要包括组织病理染色、涂片染色等;尿素酶依赖方法主要包括尿素呼气试验、快速尿素酶试验等;血清学方法主要包括ELISA检测法、酶免法、乳胶凝集试验、Western-blot法等;分子检测可通过胃黏膜组织、胃液、粪便等进行检测。

随着分子生物学技术的发展，分子生物学检测方法在H.pylori感染检测中的应用也越来越多，并显示出良好的发展前景。特别是由于分子生物学技术的高通量特性，可以在做出H.pylori感染诊断的同时，给出大量有关H.pylori对常用抗生素(特别是对大环内酯类抗生素和喹诺酮类抗生素等)的药物敏感性等重要信息;也由于分子生物学技术具有所用样品量少和检测敏感性高等特点，使原来的许多侵入性H.pylori检测方法转变为了非侵入性检测方法。

二、H.pylori感染检测中应注意的问题

(一）不同检测试剂的准确性存在差异

任何检测方法都存在假阴性和假阳性可能，应用的试剂和方法应经过验证。

H.pylori是已知所有病原菌中菌株间差异最大的一种细菌，由于不同地域、不同人群感染菌的株菌可能在基因特征和抗原表型等方面具有明显的差异，从而影响到相关检测方法应用结果的一致性。因此，当一种新的H.pylori检测方法被引入一个新的人群时，需要进行充分的方法学评价，必要时还会根据特定人群中检测方法评价中发现的问题，进行针对性方法学改进。检测结果的准确性受到操作人员和操作方法差异的影响会出现差异。不同检测方法、不同生产企业产品、不同用户对检测方法的应用都会影响H.pylori检测的效果。

(二）影响H.pylori检测结果的相关临床因素

1.药物因素

抗生素、铋剂和某些有治疗H.pylori作用的中药(还包括含有黄莲、大黄等清热解毒成分的中成药或者汤药)的应用可导致H.pylori检测出现假阴性结果，尤其对于尿素酶依赖试验，应在停用上述药物至少4周后进行检测，而服用抑酸剂者应在至少停药2周后进行检测。

质子泵抑制剂(PPI)具有抗H.pylori活性作用，并可以降低细菌负荷量，从而导致尿素酶依赖试验、SAT检测出现假阴性结果。H2受体拮抗剂对UBT的敏感性也存在轻度的影响，而抗酸剂对UBT或者SAT检测的敏感性没有影响。

药物可致H.pylori变形(球样改变)，当组织学检查发现有中性粒细胞浸润时，大多数这种球样菌是H.pylori，结合H.pylori抗体检测可以明确证实是否感染H.pylori。

2.疾病因素

消化性溃疡活动出血、胃恶性肿瘤、伴有弥漫性肠化生的重度萎缩性胃炎、胆汁反流性胃炎，由于患者胃内细菌负荷量减少，可能会导致检测结果假阴性。

活动性消化性溃疡患者排除NSAID和(或)阿司匹林因素后，H.pylori感染的可能性>95%，在这种情况下，如H.pylori检测阴性，要高度怀疑假阴性可能，在不同时间或釆用多种方法检测可取得更可靠的结果。

胃动力异常可能导致UBT检测结果不准确，尿素试剂经尿素酶分解产生的碳酸氢根离子需在胃肠道吸收，胃动力较强者UBT的峰值提前，胃动力减弱者UBT的峰值延迟(如存在幽门梗阻和胃轻瘫)，从而导致UBT假阴性的结果。

残胃者采用UBT检测H.pylori结果不可靠，由于受肠道其他产尿素酶细菌的影响可能出现假阳性结果，宜采用RUT、组织学染色或SAT等方法进行检测。

对于因消化不良症状而接受内镜检查患者，有研究显示当内镜下观察没有发现明显的可见病变时，其H.pylori的感染率与内镜下有可见病变患者无明显差异，因此对于内镜检查没有发现明显病变的消化不良患者也应当进行H.pylori感染的相关检测。