科学家探索小分子药物在体外对抗重症COVID-19的疗效

科学家探索小分子药物在体外对抗重症 COVID-19 的疗效

在最近发布到bioRxiv * 预印本服务器的一项研究中，研究人员评估了小分子药物在体外对严重急性呼吸

系统综合症冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) 的疗效。

*TIPS: bioRxiv 发布未经同行评审的初步科学报告，因此不应被视为结论性的、指导临床实践/健康相关

行为的、或被视为既定信息。

本研究的作者先前表明，抗 SARS-CoV-2 S（刺突）蛋白免疫球蛋白 G (IgG) 滴度主要参与严重的 

SARS-CoV-2 感染，因为它们会引发巨噬细胞过度活化、破坏内皮完整性并诱导血栓的形成。产生的过度

炎症反应取决于具有非典型片段可结晶 (Fc) 尾区糖基化的抗 S IgG 的滴度。开发能够抵消抗体引起的

过度炎症，同时最大限度地减少抗 SARS-CoV-2 免疫反应抑制的药物，可以扩大 2019 冠状病毒病 

(COVID-19) 的治疗范围。

在本研究中，研究人员发现了小分子抑制剂，可以抵消严重 SARS-CoV-2 感染中抗体诱导的过度炎症反应

。

开发了一种巨噬细胞活化测定法，能够评估化合物针对抗 S 靶向炎症反应的功效和效力，并用于筛选授

权的研究性小分子抑制剂分子。根据激活巨噬细胞的 IC 50（半数最大抑制浓度）值，对抗 S 介导的过

度炎症的选择性和效力进行了量化。使用 M-CSF（巨噬细胞集落刺激因子）和 il=10（白细胞介素 10）

分化的 MDAM（单核细胞衍生的肺泡巨噬细胞样巨噬细胞）。基于 IL-6 表达评估巨噬细胞促炎反应。

SYK(脾相关酪氨酸激酶)小分子抑制剂、entospletinib 和 R406 (fostamatinib 的激活形式)和磷酸肌醇

3 激酶 (PI3K) 抑制剂的疗效与地塞米松进行了比较。研究小组用阿姆斯特丹大学医学中心(UMC)收治的

感染 SARS-CoV-2 武汉- hu -1 株的 COVID-19 患者的血清样本培养 SARS-CoV-2 S，并生成抗S IgG滴度

。在重症监护室(ICU)入院期间采集血清。这些发现在体外实验中得到验证，BAL(支气管肺泡灌洗)获得的

人肺泡巨噬细胞被激活。

此外，用激活的 MDAM 处理HPMVEC(人肺微血管内皮细胞)，并监测 HPMVEC 跨内皮电阻。通过将血小板添

加到巨噬细胞条件培养基激活的 HPMVEC 中，测试了强效小分子药物对原位血栓形成的影响。血小板粘附

被评估为 von Willebrand 因子 (vWF)- 和 S-靶向 IgG 免疫复合物，由 COVA1-18 形成，这是一种重组 

mAb（单克隆抗体），显示具有非典型糖基化的抗 S IgG 效价（78% 和 9% 半乳糖基化和研究小组研究了

各种 SARS-CoV-2 相关变体 (VOC) 的抗 S IgG 免疫复合物诱导的超炎症反应，例如 Alpha、Beta、

Gamma 和 Delta VOC 以及 Wuhan-Hu-1 株。

多种 PI3K 和 SYK 抑制剂可抵消抗 S 免疫复合物介导的炎症。Entospletinib 是一种 SYK 抑制剂，被

确定为最有希望对抗 SARS-CoV-2 S IgG 诱导的过度炎症、内皮屏障完整性破坏、血小板粘附和血栓形成

的候选药物。此外，entospletinib 抑制了由几种 SARS-CoV-2 VOC 诱导的抗 S IgG 介导的过度炎症。

Entospletinib 和 R406 比地塞米松更有效地阻断抗 S 过度炎症。

Entospletinib 对聚肌苷：聚胞苷酸 [poly(I:C)] 单独激活的巨噬细胞没有影响。PI3K 抑制剂需要比 

SYK 抑制剂更高的浓度（超过 10.0 μM）才能抑制 80% 的抗 S IL-6，而在 PI3K 抑制剂中，Alpelisib 

最有效地降低了 IL-6 的表达。Duvelisib，一种 PI3K-Gamma/Delta 抑制剂，在抗 S 和聚肌苷酸免疫复

合物的共同刺激下降低 IL-6 表达，在仅含聚肌苷:聚胞苷酸的条件下，该小分子以剂量依赖的方式增强

IL-6的产生。

另一种 PI3K-Delta 抑制剂 idelalisib 可平衡抗 S 介导的 IL-6 表达，而对抗 SARS-CoV-2 反应没有

影响。在两个最大浓度下，观察到仅聚肌胞苷：聚胞苷酸条件下的生存力降低和 IL-6 表达增强。研究结

果表明，SYK 抑制剂比 PI3K 抑制剂分子更有效。PI3K 和 SYK 抑制剂显示出比地塞米松更具选择性的过

度炎症对抗作用。Entospletinib 和 R406 抑制抗 S IL-6 表达，从而将细胞因子表达降低至聚肌苷：聚

胞苷酸条件浓度。在血清衍生的免疫复合物激活后，两种 SYK 抑制剂显示出相当的离体和体外抑制作用

。

Entospletinib 选择性地抵消了 SARS-CoV-2 和血清来源的 抗S 免疫复合物刺激巨噬细胞产生的内皮屏

障破坏介质。凝血细胞较少程度地粘附于暴露于由内托普利尼处理的巨噬细胞组成的多肌苷:聚胞苷酸和

血清共活化的 HPMVEC。非典型糖基化免疫复合物协同血小板粘附于vWF。与COVA1-18单抗对照相比，

entopletinib平衡了血栓形成的增加和血栓体积的降低。Entospletinib 和 R406 对所有 VOC 的 IL-6 

表达降低了 75% 至 95%。

总的来说，研究结果表明，SYK 信号传导阻断是一种有效的策略，可以抵消血清衍生免疫复合物诱导的肺

泡巨噬细胞过度活化。Entospletinib 被发现是最有前途的针对严重 COVID-19 的 SYK 抑制剂。