精子冷冻和解冻过程，您了解吗

14.4.1冷冻和解冻过程

       冷冻技术目前应用没有处在最佳状态，因为在冷冻的期间以及长期的储存中出现细胞的损害。大多数的损害出现在冷冻和解冻的过程中。冷冻过程中出现损害的主要原因是冰晶体形成和细胞脱水，破坏细胞壁（膜）和胞内细胞器。精子形态，质量和活力在解冻后明显降低，而且冷冻增加了精子DNA的损害。进一步的损害由样品被微生物和高水平的超氧化物自由基污染引起，为了降低冰晶体形成和细胞脱水，在冷冻之前增加了一个冷冻保存方案。各种冷冻保存解决方案在商业上是可行的，其中绝大多数都含有不同比例的甘油和白蛋白。冷冻之后样品沉浸在液态氮中。一些技术已经开发出来,试图减少冻融造成的损害，其中包括

       一步冻结法，样品在投入液态氮之前固定在气相10分钟

       缓慢或多步骤的方法，样品在逐渐冷却的汽相中大约40待分钟，使用

       一个可编程的自动冻结机,预设冷却率为1 - 10°C / min。

       方法的可行性取决于实验室的资源。使用冻结技术,应该测试捐赠者的精子和解冻后检查,并应定期进行质量控制计划。

       精子生存的可能性随反复冻融而减少。人类精子的最大可行的储存时间是未知的。许多实验室或监管当局申请的存储上制是10年。然而，有时需要更长期的保存（例如一个17岁的人在进行睾丸癌化疗前储存的精子的保存）。

14.4.2小数量的精子冷冻保存

       在吸管里标准的冷冻保存是一种有效的方式来储存大量的精子（例如捐受精计划）。然而，在显微睾丸取精术中有可能得到很少的精子，并且或者冷冻睾丸组织在融化组织后获得精子，或者冷冻很少数量的精子。如果精子被冻结在吸管，融化后很难发现任何精子。相反，精子应该冻结在一个球形或一个容器中。

       中国中医科学院西苑医院男科高庆和 翻译   资料《2013EAU男性不育症诊治指南》